Epithelial-mesenchymal markers and their correlation with clinical aspects in odontogenic keratocysts / Marcadores epitélio-mesênquima e sua correlação com aspectos clínicos em lesões de ceratocisto odontogênico

ABSTRACT Objective: Odontogenic keratocysts have a high recurrence rate and aggressive clinical behavior. The event called epithelial-mesenchymal transition is a process in which the epithelial cell loses its epithelial characteristics and acquires properties typical of mesenchymal cells. Studies have already demonstrated that odontogenic keratocysts has expression of tumor markers, but the lack of clarification about its development mechanism and molecular composition makes the therapeutic options remain limited. The aim of this study is to evaluate the expression of epithelial-mesenchymal transition marker proteins in these lesions, correlating the expression of these proteins with clinical aspects of each case. Methods: Patients with odontogenic keratocysts diagnoses, treated by the Department of Oral and Maxillofacial Surgery of the Erasto Gaertner Hospital, Curitiba, Brazil in the period between 2016 and 2019 were evaluated by immunohistochemical analysis, to assess the expression of epithelial-mesenchymal transition markers (Vimentin, beta-catenin and E-cadherin) by qualitative analysis. Results: Eighteen patients were included, with a mean age of 43 years, and most of them were male. The mandible was more affected than the maxilla. No association between the clinical characteristics of the cysts and the immunohistochemical profile for epithelial-mesenchymal transition proteins was observed. Conclusion: The positivity of E-cadherin and negativity of vimentin demonstrates that its function is preserved. Loss of function of E-cadherin is associated with worse prognosis. The identification of the epithelial-mesenchymal transition process as a prognostic marker for odontogenic cysts and tumors could be an important tool for defining treatment.

RESUMO Objetivo: O ceratocisto odontogênico têm uma alta taxa de recorrência e comportamento clínico agressivo. O evento chamado transição epitelial-mesênquima (TEM) é um processo no qual a célula epitelial perde suas características epiteliais e adquire propriedades típicas das células mesenquimais. Estudos já demonstraram que o ceratocisto odontogênico tem expressão de marcadores tumorais, mas a falta de esclarecimento sobre seu mecanismo de desenvolvimento e composição molecular faz com que as opções terapêuticas permaneçam limitadas. O objetivo deste estudo é avaliar a expressão das proteínas marcadoras de transição epitelial-mesênquima nestas lesões, correlacionando a expressão destas proteínas com os aspectos clínicos de cada caso. Métodos: Os pacientes com diagnóstico de ceratocisto odontogênico, tratados pelo Serviço de Cirurgia Bucomaxilofacial do Hospital Erasto Gaertner, Curitiba, Brasil, no período entre 2016 e 2019, foram avaliados por análise imunohistoquímica, para avaliar a expressão dos marcadores transição epitelial-mesênquima (Vimentina, beta-catenina e E-cadherina). Resultados: Foram incluídos 18 pacientes, com idade média de 43 anos, e a maioria deles eram do sexo masculino. A mandíbula foi mais afetada do que a maxila. Não foi observada associação entre as características clínicas dos cistos e o perfil imuno-histoquímico das proteínas transição epitelial-mesênquima. Conclusão: A positividade da E-caderina e a negatividade da vimentina demonstram que a sua função está preservada. A perda da função da E-caderina está associada a um pior prognóstico. Identificar o processo da transição epitelial-mesênquima como um marcador de prognóstico para cistos e tumores odontogênicos pode ser uma ferramenta importante para definir o tratamento dessas lesões.

O processo de cicatrização influenciado pelo hipotireoidismo e pelo envelhecimento: estudo da cicatrização de anastomoses intestinais, em ratos

TURPOSE: The aging of the population has led to an increased number of interventions in elderly patients, with hypothyroidism, even at the subclinical level, being a common situation among these patients. The objective of the present study was to determine the influence of hypothyroidism on the healing process of colon anastomoses in aged rats. METHODS: 96 male Wistar rats were used, 48 of them young and 48 old. Half the young animals and half the old ones were euthyroid and half were hypothyroid. Hypothyroidism was obtained by total thyroidectomy. Thirty days after surgery the animals were submitted to median laparotomy followed by transverse colotomy of the left colon with end-to-end anastomosis and laparorrhaphy. Six animals from each group were submitted to euthanasia by drawing lots on the 3rd, 7th and 14th postoperative day and submitted to macroscopic, resistance, and histopathological analysis of the anastomoses. RESULTS: No dehiscence was observed and the gain of resistance and the general histological evolution in terms of epithelialization and inflammatory reaction was similar in all groups. Analysis of total collagen content revealed that the anastomoses of young and old animals showed the same behavior on the 3rd day, although less collagen was observed in hypothyroid animals (YN x YH p=0.0000; ON x OH p=0.0000). This behavior persisted on the 7th and 14th day. Less collagen I was present in the anastomoses of hypothyroid animals on the 3rd (YN x YH p=0.0015; ON x OH p=0.0000), 7th (YN x YH p=0.0006; ON x OH p=0.0001) and 14th day (YN x YH p=0.0181; ON x OH p=0.0057), the same occurring for collagen III on the 3rd (x YH p=0.0007; ON x OH p=0.0260), 7th (YN x YH p=0.0160; ON x OH p=0.2670) and 14th day (YN x YH p=0.0000; ON x OH p=0.0030). CONCLUSION: Analysis of the results permitted us to conclude that lower collagen concentration due to low synthesis and delayed scar maturation in the anastomoses occurred and was much more due to hypothyroidism than to aging.

OBJETIVO: O envelhecimento da população tem feito crescer o número de intervenções em pacientes idosos, sendo o hipotireoidismo, ainda que sub-clínico, é uma situação bastante comum nestes doentes. O presente estudo busca conhecer a influência do hipotireoidismo no processo de cicatrização de anastomoses colônicas em ratos idosos. MÉTODO: Utilizaram-se 96 ratos Wistar, machos; 48 deles jovens e 48 velhos. Metade dos animais jovens e metade dos velhos eram eutireoideanos e metade eram hipotireoideanos. Conseguiu-se o hipotireoidismo por meio de tireoidectomia total. Após 30 dias, fez-se uma laparotomia mediana seguida de colotomia transversa de cólon esquerdo com anastomose término-terminal e laparorrafia. No 3.º, 7.º e 14.º dias de pós-operatório, sorteados, 6 animais de cada grupo, que foram submetidos à eutanásia. Fez-se a análise macroscópica das anastomoses, da resistência e estudo histopatológico. RESULTADOS: Não se detectaram deiscências e o ganho de resistência e a evolução histológica geral, considerando epitelização e reação inflamatória foi semelhante em todos os grupos. A análise do conteúdo total de colágeno revelou, no 3.º dia, que as anastomoses de jovens e velhos tinham o mesmo comportamento, porém via-se menos colágeno nas anastomoses dos animais com hipotireoidismo (JN x JH p=0,0000; VN x VH p=0,0000). Este comportamento se manteve no 7.º e no 14.º dia. A presença de colágeno I era menor nas anastomoses dos animais hipotireoideanos no 3.º dia (JN x JH p=0,0015; VN x VH p=0,0000), no 7.º dia (JN x JH p=0,0006; VN x VH p=0,0001) e no 14.º dia (JN x JH p=0,0181; VN x VH p=0,0057) o mesmo acontecendo com o colágeno III, no 3.º dia (x JH p=0,0007; VN x VH p=0,0260), no 7.º dia (JN x JH p=0,0160; VN x VH p=0,2670) e no 14.º dia (JN x JH p=0,0000; VN x VH p=0,0030). CONCLUSÃO: A análise dos resultados permite concluir que existe diminuição da concentração de colágeno decorrente da baixa da síntese e retardo de maturação das cicatrizes das anastomoses muito mais às custas do hipotireoidismo do que do envelhecimento.

O processo de cicatrização influenciado pelo hipotireoidismo e pelo envelhecimento: estudo da cicatrização da parede abdominal, em ratos

PURPOSE: Hypothyroidism is a common situation among the aged which affects protein synthesis. The objective of the present study was to determine the influence of hypothyroidism on the healing process in aged rats. METHODS: 96 male Wistar rats were used, 48 of them with a mean age of 110 days and 48 with a mean age of 750 days. Half the young animals and half the old ones were euthyroid and half were hypothyroid. Hypothyroidism was obtained by total thyroidectomy. Thirty days after surgery the animals were submitted to median laparotomy followed by laparorrhaphy on 2 synthesis planes. Six animals from each group were submitted to euthanasia by drawing lots on the 3rd, 7th and 14th postoperative day and submitted to macroscopic, resistance, and histopathological analysis. RESULTS: The resistance of the skin scars was lower in hypothyroid animals, both the young (p=0.0145) and old (p=0.0242) ones, with no significant relation with age being detected. The resistance of the scars on the peritoneum-muscle-aponeurosis plane was lower in old animals on the 24th day (p=0.0014) and even lower in hypothyroid old animals (p=0.0000). The histological evolution was similar, but differences in collagen presence were observed. On the 7th day the skin scars had a lower collagen content in young (p=0.0201) and old (p=0.0003). hypothyroid animals. On the 14th day the scars of old hypothyroid animals had less collagen than those of normal old animals (p=0.0092) and those of young hypothyroid animals (p=0.0283). On the 3rd day, the scars of hypothyroid animals on the peritoneum-muscle-aponeurosis plane presented less collagen than those of both young (p=0.0089) and old (p=0.0171) normal controls, but there was no relation with age. This association persisted on the 7th and 17th day, but age dependence was observed at these time points. CONCLUSION: Analysis of the results permits us to conclude that healing is impaired in the presence of hypothyroidism and worsens with aging.

OBJETIVO: O hipotireoidismo é uma situação bastante comum nos indivíduos idosos e influencia a síntese protéica. O presente estudo busca conhecer a influência do hipotireoidismo no processo de cicatrização de ratos idosos. MÉTODO: Utilizaram-se 96 ratos Wistar, machos; 48 deles com média de idade de 110 dias e 48 com 760 dias. Metade dos animais jovens e metade dos velhos eram eutireoideanos e metade eram hipotireoideanos. Conseguiu-se o hipotireoidismo por meio de tireoidectomia total. Após 30 dias, fez-se uma laparotomia mediana seguida de laparorrafia com 2 planos de síntese. No 3.º, 7.º e 14.º dias de pós-operatório, sorteados, 6 animais de cada grupo, foram submetidos à eutanásia. Fez-se a análise macroscópica, da resistência e histopatológica. RESULTADOS: A resistência das cicatrizes da pele, foi menor nos animais hipotireoideanos, tanto jovens (p=0,0145), quanto velhos (p=0,0242), não se encontrando relação significante com a idade. A resistência das cicatrizes do plano peritônio-músculo-aponevrótico,foi menor nos animais velhos, no 14.º dia (p=0,0014) e ainda menor quando eram velhos e hipotireoideanos (p=0,0000). A evolução histológica foi semelhante, entretanto, existiram diferenças quanto à presença de colágeno. No 7.º dia as cicatrizes cutâneas apresentavam menor conteúdo de colágeno nos animais hipotireoideanos, jovens(p=0,0201) e velhos (p=0,0003). No 14.º dia as cicatrizes dos velhos hipotireoideanos tinham menos colágeno do que as dos velhos normais (p=0,0092) e menos do que as dos jovens hipotireodeanos (p=0,0283). No plano peritônio-músculo-aponevrótico, no 3.º dia, as cicatrizes dos animais hipotireoideanos apresentavam menos colágeno do que as dos controle normais, tanto jovens (p=0,0089) quanto velhos (p=0,0171), mas não havia relação com a idade. Esta associação se manteve nas avaliações do 7.º e do 14.º dia, porém nestes tempos observou-se dependência da idade. CONCLUSÃO: A análise dos resultados permite concluir que existe prejuízo da cicatrização na presença de hipotireoidismo que é piorada com o envelhecimento.